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ELISA試劑盒活化細胞分泌細胞因子

2016-02-19 [1229]

目前ELISA法仍在研究當中占有著主流地位,ELISA試劑盒的普遍應用使得實驗更加方便、經濟和準確,ELISPOT技術的優(yōu)點也決定了它的發(fā)展?jié)摿?。LISPOT法來源于ELISA,相比較傳統(tǒng)的ELISA法有所突破,是定量ELISA技術的延伸和發(fā)展。ELISA試劑盒由于游離的循環(huán)抗體或CK的半哀期不同,使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官結合,傳統(tǒng)的酶聯免疫吸附法(ELISA法)不能確切的反映體內的抗體及CK的水平。80年代,國外的科研工作者根據ELISA技術的基本原理,建立了體外檢測特異性抗體分泌細胞和CK分泌細胞的固相酶聯免疫斑點技術(ELISPOT)。
    隨著ELISPOT技術的不斷發(fā)展,它的優(yōu)勢也漸漸顯示出來,下面將ELISPOT與ELISA法對比區(qū)分。 ?由于是單細胞水平檢測,ELISPOT比ELISA試劑盒更靈敏,能從20萬-30萬細胞中檢出1個分泌該蛋白的細胞。 
    捕獲抗體具有高親和力、高特異性、低內毒素的單抗,在研究者以刺激劑激活細胞時,不會影響活化細胞分泌細胞因子。 
    
    ELISA試劑盒通過顯色反應,在酶標儀上測定吸光度,與標準曲線比較得出可溶性蛋白總量。 
    ELISPOT 也是通過顯色反應,ELISA試劑盒在細胞分泌這種可溶性蛋白的相應位置上顯現清晰可辨的斑點,可直接在顯微鏡下人工計數斑點或通過計算機輔助的分析系統(tǒng)對斑點進行計數, 1個斑點代表1個細胞,從而計算出分泌該蛋白的細胞的頻率。(某些研究不僅要測細胞因子生成量,還需檢測分泌此細胞因子的細胞頻率) 

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