白介素試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被白介素捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中的白介素呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，計算樣品濃度。
 

　　從六個方面認識白介素試劑盒：
 

　　1.靈敏度：為試劑檢出被檢物質的低量的能力和試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。
 

　　2.特異性：常用交叉反應率表示。含有與待測物相近結構部分的物質可能存在交叉反應，使測定結果升高，可能導致假陽性，所以交叉反應是評價其質量的關鍵指標。
 

　　3.精密度：一般指其批內CV%，其值應小于15%；定量試劑應同時考察線性范圍。
 

　　4.準確度：通過添加回收實驗進行評價。
 

　　5.安全性：指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
 

　　6.經(jīng)濟性：試劑在同等質量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術進步降低成本，而市場價格比較合理。
 

　　白介素試劑盒操作步驟：
 

　　1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
 

　　2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
 

　　3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
 

　　4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
 

　　5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液(350μL)，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
 

　　6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
 

　　7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。