Elisa試劑盒具有敏感性高，特異性強，快速等特點，目前廣泛應(yīng)用于農(nóng)獸藥、真菌殘留檢測。但該方法從加樣、洗板、顯色到讀數(shù)步驟繁多，其中任何一步控制不好都可能影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，在實際測定操作中一定要注意以下幾點。
 
一、溫度
 
1.試劑盒回溫

大多數(shù)ELISA檢測試劑盒為冷藏(2℃-8℃)保存。從冰箱拿出來后，先不要急于打開試劑盒，要等試劑盒的溫度平衡至室溫且試劑盒盒表面無冷凝水。檢測所用的試劑需充分混勻且*溶解后再用。提前1~2小時取出試劑盒，放在室溫中；或在預(yù)設(shè)25℃恒溫培養(yǎng)箱中平衡30分鐘~60分鐘。

 
2.環(huán)境溫度的控制
 
實驗室可采用以下措施控制溫度：
 
1)實驗室應(yīng)配備溫濕度表，且確保定期計量。
 
2)根據(jù)天氣情況設(shè)定實驗室空調(diào)制冷或加溫功能，待室溫穩(wěn)定且無干擾的條件下再開始檢測流程。
 
3)選用帶溫控裝置的孵育儀器，如恒溫孵育器、恒溫培養(yǎng)箱、多功能酶標(biāo)儀等。注意要提前開啟預(yù)熱。
 
大多數(shù)試劑盒加樣后反應(yīng)時間較短，環(huán)境溫度對檢測結(jié)果會有很大影響，所以控制好環(huán)境溫度是保證試劑盒檢測結(jié)果有效的重要因素。
 
3.孵育
 
孵育時要保證溫度均勻，防止揮發(fā)變干。孵育時使用封板膜，并置于暗處孵育。多塊板一起實驗時，要平放各板，不要疊放，避免溫度擴散的不均勻性或邊緣效應(yīng)。
 
二、剩余試劑的妥善保存

Elisa試劑盒恢復(fù)至室溫后，取出要使用的酶標(biāo)板孔，未使用的酶標(biāo)板孔應(yīng)及時放回鋁箔袋，加入干燥劑，封緊封口，2℃-8℃冷藏保存。
 
切忌將未*平衡至室溫的酶標(biāo)板放回鋁箔袋，因為此時由于溫度差，酶標(biāo)板上會有水汽，不利于穩(wěn)定保存。
 
三、加樣
 
1.加樣要快速準(zhǔn)確，時間宜控制在15分鐘內(nèi)。
 
2.如樣品量較大，可分次完成實驗，或?qū)y樣液置于預(yù)混微孔板中使用多通道移液器快速移取。
 
3.吸取同一試劑，可將試劑倒入V型加樣槽中，使用多通道移液器快速移取。