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處理羊ELISA試劑盒有哪些要求

2019-01-28 [1756]

需要在試驗前1小時將羊ELISA試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都康復(fù)到室溫,以使結(jié)果更安穩(wěn)。試驗時,要使底物避光保存,用槍汲取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使汲取量不準(zhǔn)確,汲取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差,要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過百分之2。

1.血清:室溫血液天然凝結(jié)10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,保存過程中如呈現(xiàn)沉積,應(yīng)再次離心。

2.血漿:應(yīng)根據(jù)羊ELISA試劑盒的標(biāo)本的要求挑選EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),保存過程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)該再次離心。

3.尿液:用無菌管搜集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,保存過程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。

4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度到達(dá)100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。

5.安排標(biāo)本:切開標(biāo)本后,稱取分量。參加一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本消融后依然堅持2-8℃的溫度。參加一定量的PBS,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充沛。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。分裝后一份待檢測,其他冷凍備用。

6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行試驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)防止反復(fù)凍融. 

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