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酶聯免疫吸附測定ELISA操作中標本的收集
2011-10-26
1763
酶聯免疫吸附測定ELISA操作中標本的收集用于ELISA測定的臨床標本zui為常用的是血清(漿),有時因為特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前使用血清(漿)標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標本的收集,要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結果產生影響。如可的松在早晨4:00—6:00之間,會有一峰值出現;生長激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發(fā)...
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酶標抗體的質量鑒定與保存
2011-10-24
1934
酶標抗體的質量鑒定與保存1.酶活性和抗體效價測定采用雙向免疫擴散法(稀釋抗體)和DAB-H2O2顯色反應檢測結合物中抗體效價和免疫沉淀線中的酶促反應。2.酶量和IgG量酶量(mg/ml)=OD403′0.4IgG量(mg/ml)=(OD280-OD402′0.42)′0.94′0.62其中,0.42為酶蛋白本身(0.3)及結合戊二醛后增加的OD值,0.94為抗體蛋白與醛化酶結合后,OD280約增加6%,故乘以0.94。兔IgG的OD280=1.0時為0.62.過碘酸鈉標記法I...
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ELISA法檢測干擾素
2011-10-20
1867
ELISA法檢測干擾素干擾素(IFN)是一類具有廣譜抗病毒活性的蛋白質,僅在同種細胞上發(fā)揮作用。根據其來源、理化及生物學性質的不同,可分為IFN-α、IFN-β、IFN-γ3種干擾素。其中,IFN-α主要由白細胞產生,IFN-β由成纖維細胞產生,IFN-γ主要由T細胞在免疫應答中受到抗原或絲裂原活化后分泌產生。3種干擾素中,IFN-α、IFN-β抗病毒作用較強,IFN-丁免疫調節(jié)作用較強。目前已可用基因重組技術制備干擾素投入臨床使用。干擾素不能直接滅活病毒,其抗病毒作用是由于...
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通過噬菌體ELISA鑒定得到的噬菌體克隆
2011-10-18
2633
通過噬菌體ELISA鑒定得到的噬菌體克隆經過3~4輪的篩選后,應該能夠富集到能與受體特異性結合的噬菌體群體。通常而言,在后幾輪的篩選中,每次獲得的噬菌體總量都會增加,但是單就這個現象并不一定能說明已經篩選到了受體特異性結合的肽段。能與靶分子非特異性結合或者能與篩選基質的噬菌體克隆也會造成這一現象。噬菌體ELISA可以說是zui靈敏的鑒定所獲取的噬菌體克隆結合特異性的方法之一。受體被包被在各孔中,與之結合的噬菌體通過辣根過氧化物酶偶聯的抗M13噬菌體抗體檢測。只含有捕獲抗體或者...
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ABC-ELISA材料和方法
2011-10-12
1887
BAS酶聯免疫吸附試驗材料和方法(以篩選抗空腸彎曲菌共同抗原的單克隆抗體為例)1材料(1)空腸彎曲菌共同抗原提取物,自制。BAS酶聯免疫吸附試驗材料和方法(2)生物素化羊抗鼠IgG(BSAMG),衛(wèi)生部上海生物制品所。(3)ABC試劑,衛(wèi)生部上海生物制品所。如ABC試劑需自己配制,可按說明要求,將親和素與酶標生物素按一定比例混合,置37℃孵育30min后使用。(4)被檢雜交瘤培養(yǎng)物上清液。(5)其他試劑及器材同常規(guī)ELISA法。BAS酶聯免疫吸附試驗材料和方法2方法ABCEL...
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ELISA質量控制--室內質量控制程序
2011-10-11
1767
臨床檢驗的檢測結果,每次或每天之間不可能*。決定允許的誤差范圍,以臨床上不造成誤診與漏診為準,通過以下步驟來確定質控范圍。ELISA質量控制--室內質量控制程序一、*條件下的測定誤差*條件下已知值質控血清變異(optimalconditionsvariance,簡稱OCV)的測定:在本實驗室*條件下(包括操作者、試劑、儀器等)檢測質控血清20-30次,測得結果計算,求出該組數據的均值和標準差(SD)表示該實驗室的*工作質量?,F舉例說明HBsAgELISA法檢測時OCV的測定。...